為了更好地適應醫(yī)學教育改革和發(fā)展的需要，實現(xiàn)生物化學與分子生物學實驗課程的目標，我們在第2版的基礎上，編寫了《生物化學與分子生物學實驗教程》第3版。全書為兩篇：第一篇系統(tǒng)介紹了生物化學與分子生物學實驗基本知識與理論；第二篇為生物化學與分子生物學實驗操作，共修訂精選了51個生物化學與分子生物學的具體實驗。另外，在附錄中匯集了常用生物化學與分子生物學試劑的配制方法。本書在內(nèi)容框架上進行了調(diào)整，對實驗操作進行了分類。內(nèi)容設置方面既包括生物化學與分子生物學的基本實驗技術(shù)和方法、生物信息學工具在生物化學與分子生物學研究中的應用，也特別強調(diào)基本技術(shù)與應用、進展結(jié)合，如實驗技術(shù)與臨床診斷和治療應用的結(jié)合，前沿分子生物學技術(shù)引入等。
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目錄
第一篇 生物化學與分子生物學實驗基本知識與理論
第一部分 生物化學與分子生物學實驗基本知識 1
第二部分 生物化學實驗基本技術(shù)理論 14
第三部分 分子生物學實驗基本技術(shù)理論 46
第四部分 生物化學與分子生物學專業(yè)常用生物信息學分析 71
第二篇 生物化學與分子生物學實驗操作
第五部分 蛋白質(zhì)理化性質(zhì) 84
第1章 蛋白質(zhì)的兩性反應與等電點的簡易測定 84
第2章 蛋白質(zhì)的沉淀反應 86
第3章 蛋白質(zhì)的熱變性 88
第六部分 蛋白質(zhì)含量測定 91
第4章 凱氏定氮法測定蛋白質(zhì)含量 91
第5章 Folin-酚試劑法測定蛋白質(zhì)含量 94
第6章 考馬斯亮藍染色法測定蛋白質(zhì)含量 96
第7章 紫外吸收法測定蛋白質(zhì)含量 98
第8章 BCA法測定蛋白質(zhì)含量 100
第9章 溴甲酚綠法測定白蛋白含量 102
第七部分 蛋白質(zhì)及氨基酸分離 104
第10章 醋酸纖維素薄膜電泳分離血清蛋白 104
第11章 SDS-PAGE蛋白電泳 106
第12章 單向上行紙層析分離氨基酸 109
第13章 凝膠柱層析分離蛋白質(zhì) 111
第八部分 酶活性及酶促反應速度檢測 115
第14章 溫度對酶活性的影響 115
第15章 pH對酶活性的影響 116
第16章 抑制劑和激活劑對酶活性的影響 117
第17章 尿淀粉酶活性的測定 120
第18章 酶反應速度與米氏常數(shù)測定 121
第九部分 營養(yǎng)物質(zhì)及代謝產(chǎn)物測定 126
第19章 血清葡萄糖的測定 126
第20章 血清甘油三酯的測定 128
第21章 血清膽固醇的測定 130
第22章 血清高密度脂蛋白膽固醇及其亞組分測定 134
第23章 血清尿素含量測定（脲酶 - 谷氨酸脫氫酶法） 136
第24章 血液和尿中肌酐含量測定 138
第十部分 核酸分離 141
第25章 動物組織DNA的分離提取、鑒定及含量測定 141
第26章 動物組織RNA的分離提取、鑒定及含量測定 143
第十一部分 PCR技術(shù) 145
第27章 常規(guī)PCR 145
第28章 RT-PCR 146
第29章 實時定量PCR 149
第十二部分 重組DNA技術(shù) 152
第30章 質(zhì)粒DNA的分離提取 152
第31章 質(zhì)粒DNA的酶切、電泳及DNA片段的回收 153
第32章 DNA片段的連接 156
第33章 感受態(tài)細菌的制備、重組DNA的轉(zhuǎn)化與篩選 158
第34章 外源基因在大腸桿菌中的誘導表達 161
第十三部分 印跡技術(shù) 163
第35章 DNA的分子雜交——Southern印跡法 163
第36章 RNA的分子雜交——Northern印跡法 166
第37章 蛋白質(zhì)的免疫印跡——Western印跡法 169
第38章 熒光原位雜交技術(shù)——FISH技術(shù) 171
第十四部分 綜合性實驗 174
第39章 cDNA文庫的構(gòu)建 174
第40章 雙螢光素酶報告基因檢測 181
第41章 電泳遷移率變動分析實驗 184
第42章 染色質(zhì)免疫沉淀實驗 191
第43章 酵母雙雜交實驗 196
第44章 RNA干擾實驗 201
第45章 蛋白質(zhì)免疫共沉淀實驗 206
第46章 RNA免疫共沉淀實驗 208
第47章 體外蛋白質(zhì)結(jié)合分析實驗 210
第48章 單細胞轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)實驗 211
第49章 CRISPR/Cas9基因組編輯技術(shù) 216
第50章 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測血漿同型半胱氨酸 223
第51章 Seahorse監(jiān)測細胞能量代謝水平 226
附錄
附錄1 化學試劑分級與注意事項 229
附錄2 常用緩沖液的配制 231
附錄3 硫酸銨飽和度計算表 237
附錄4 常用培養(yǎng)基及抗生素的配制 239
附錄5 離心機轉(zhuǎn)速（r/min）與離心力（RCF）的換算 240
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